BRL 3A大鼠肝細(xì)胞
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BRL 3A大鼠肝細(xì)胞

BRL-3A大鼠肝細(xì)胞

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訂貨量(株)

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上海博湖生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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聯(lián)系方式
是否進(jìn)口
貨號(hào) BH-C3010
用途類別 科研
產(chǎn)品規(guī)格 5×105cells/瓶
品牌 博湖
用途范圍 產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 BRL 3A大鼠肝細(xì)胞
商品介紹

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱BRL 3A大鼠肝細(xì)胞
英文名稱:
 Rat hepatic cells BRL 3A
編號(hào)BH-C3010

培養(yǎng)操作步驟 :

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 


實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。


細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

CHEK1重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CCL24重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

KIAA0101重組人 KIAA0101 / p15 / PAF 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

VRK1重組人 VRK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

DCLK1重組人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白 (aa 1-705, His & GST 標(biāo)簽) Protein

TXNL4A重組人 DIM1 / TXNL4A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

NEIL1重組人 NEIL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ALDH4A1重組人 ALDH4A1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CGB7重組人 CGB7 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

PHGDH重組人 PGDH / PHGDH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GNG13重組人 GNG13 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IDO2重組人 IDO2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MelanA 黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體

MCP1 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體

MCSF 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體

MDM2 雙微體2癌基因抗體

Megsin 絲氨酸蛋白酶抑制劑B7抗體

Mfn1 線粒體融合蛋白1抗體

MGMT O6甲基鳥(niǎo)嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體

MUSK 肌肉骨骼受體酪氨酸激酶抗體

Mycobacterium tuberculosis Ag85B 結(jié)核分枝桿菌抗體

1-Mar 膜相關(guān)環(huán)指蛋白1抗體

2-Mar 膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體

3-Mar 膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體

7-Mar 膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體

8-Mar 膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體

9-Mar 膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體

M2-PK (pyruvate Kinase M2) 丙酮酸激酶-M2

Mesothelin 間皮素抗體

MMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體

MMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體

MMP13 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗體

MMP-14 基質(zhì)金屬蛋白酶-14抗體

MMP2 基質(zhì)金屬蛋白酶2抗體

MMP-3

BRL 3A大鼠肝細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
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