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兔抵抗素(Resistin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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兔抵抗素(Resistin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人白介素10(IL-10)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人白介素10(IL-10)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
兔抵抗素(Resistin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體50μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
兔抵抗素(Resistin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
南京卡米洛生物工程有限公司,被行業(yè)內(nèi)評(píng)為優(yōu)秀企業(yè),江蘇實(shí)驗(yàn)室聯(lián)盟企業(yè),,江蘇省質(zhì)量信用AAA級(jí)企業(yè)。主要從事各種細(xì)胞因子酶聯(lián)免疫試劑盒及其相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā),生產(chǎn),銷(xiāo)售和技術(shù)上的服務(wù)、培訓(xùn)與咨詢。公司產(chǎn)品涉及許多生命科學(xué)研究領(lǐng)域,如胚胎學(xué)、血液學(xué)、免疫學(xué)和神經(jīng)科學(xué)等等,特別是腫瘤研究領(lǐng)域。我們所研發(fā)的產(chǎn)品是致力于為中國(guó)生命科學(xué)研究領(lǐng)域的科學(xué)家們提供研究所需要的高品質(zhì)產(chǎn)品,從而加速生物制藥和生命醫(yī)學(xué)市場(chǎng)的發(fā)展,提高疾病的診斷和治療水平,以造福于全人類(lèi)。公司一直致力于各種細(xì)胞因子及其相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā),生產(chǎn)和銷(xiāo)售。卡米洛的產(chǎn)品覆蓋面廣,種類(lèi)豐富,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,其生產(chǎn)的各種ELISA試劑盒、重組因子及抗體以其卓越的品質(zhì)贏得了廣大科研院所及臨床診斷機(jī)構(gòu)的青睞。卡米洛生物工程堅(jiān)持不懈的努力,已經(jīng)研發(fā)出一大批優(yōu)質(zhì)的試劑。以最優(yōu)質(zhì)的試劑提供給廣大科研工作者,是卡米洛生物一貫的愿望,也是做事的準(zhǔn)則!公司的宗旨是“以人為本,質(zhì)量第一,顧客至上”......
兔抵抗素(Resistin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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