大鼠晶狀體組織提取物
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聯(lián)系人 郭小姐

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品牌 谷研
產(chǎn)品名稱 大鼠晶狀體組織提取物
英文名稱 Eye: Normal Rat Lens Derivatives
貨號 GOY-Y7010
規(guī)格 詳見說明書
商品介紹

參數(shù)規(guī)格:
大鼠晶狀體組織提取物Eye: Normal Rat Lens Derivatives
產(chǎn)品描述:晶狀體組織位于玻璃體前側(cè)呈雙凸透鏡狀,晶體是眼球屈光系統(tǒng)的重要組成部分,也是唯一具有調(diào)節(jié)能力的屈光間質(zhì)。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠晶狀體組織中高質(zhì)量的總RNAPCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。             

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mgRNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。            潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

產(chǎn)品名稱

大鼠晶狀體組織提取物

英文名稱

Eye: Normal Rat Lens Derivatives

貨號

GOY-Y7010

凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

實驗要點及說明
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
產(chǎn)品僅供科研使用1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
Spike Others SARS SARS Spike S1 Subunit 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1膽堿鈉;5-胞苷二1酸單鈉鹽Citicoline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

小鼠細(xì)胞白血病;L1210硬脂酸紅霉素Erythromycin stearate質(zhì)量規(guī)格:USP

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B);F9-CAG-tTA-3A1 中性蛋白酶(10mL酶解緩沖液) 1mL精胺Spermine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 Human亞精胺Spermidine質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分

TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亞精胺1酸鹽Spermidine phosphate salt hexahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),進(jìn)口原裝
IFNA5 Others Rat
大鼠 IFNA5 / IFNaG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸替羅非班(標(biāo)準(zhǔn)品)Tirofiban HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99,標(biāo)準(zhǔn)品

人前列腺成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL普魯蘭糖;普魯蘭多糖Pullulan質(zhì)量規(guī)格:Viscosity100-180 mPa-s;BR

Calu-6細(xì)胞,人退行性癌細(xì)胞 克雷伯肺炎桿菌 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21維生素 E, 生育酚Vitamin E,dl-α-tocopherol質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀

CXCL12 Protein Canine 重組狗 CXCL12 / SDF-1 蛋白司他夫定Stavudine質(zhì)量規(guī)格:>98,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 司他夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)Stavudine質(zhì)量規(guī)格:>98,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠晶狀體組織提取物IFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白PROTEINGELLOADINGBUFFER2X,WITHPYRONINY蛋白膠上樣緩沖液,2X 含派洛寧Y蛋白組學(xué)級橙粉紅色液體RTsigma

INS-1(大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 脆弱擬桿菌BETA-BqTc-HCH 319-82-7

肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)亞甲基藍(lán) Methylene blue (Dye content, 82%) 7220-79-3 10G 染色劑

HAVCR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 四乙酰呋核糖,英文名或英文縮寫:1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose,級別:,98%,規(guī)格:10毫升

人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株;Mo7eL-Threonine 5g Sigma分裝
收到大鼠晶狀體組織提取物如何處理?
1
、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3
、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。

聯(lián)系方式
公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
聯(lián)系賣家 郭小姐 (QQ:3004905818)
電話 莶莺-莵莹莸-莾莼莻莼莺莾莹莵
手機(jī) 莸莻莵莹莺莻莻莻莼莽莾
傳真 莵莹莸-莾莸莾莹莹莽莽莸
網(wǎng)址 http://www.bio-goy.com/
地址 上海市松江區(qū)