概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實驗方法步驟：

饒氏無綠藻探針法熒光定量PCR試劑盒說明書方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：

1．基礎(chǔ)程序；

2．擴增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學；

8．PCR擴增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結(jié)果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標準：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f豚鼠促卵泡素elisa試劑盒   豚鼠促卵泡素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠促卵泡素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠促卵泡素試劑盒、豚鼠促卵泡素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Ambrisentan  中文名：安倍生坦  分子式：C22H22N2O4  度：98.0%

豚鼠促卵泡素(FSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Ambroxol hydrochloride  中文名：鹽酸氨溴索  分子式：C13H19Br2ClN2O 

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ambrisentan  177036-94-1  中文名：安倍生坦  分子式：C22H22N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Altrenogest  850-52-2  中文名：烯丙孕素  分子式：C21H26O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Triethyl citrate  中文名：檸檬酸三乙酯  分子式：C12H20O7

Tinidazole  中文名：替硝唑  分子式：C8H13N3O4S  度：98.0%  小鼠I型膠原蛋白（COL-1）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2-Acetonaphthone  中文名：2'-萘乙酮  分子式：C12H10O  度：98.0%  小鼠IP-10(mouse IP-10)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

1'-Acetonaphthone  中文名：1'-萘乙酮  分子式：C12H10O  度：98.0%  小鼠8異前列腺素(mouse 8-iso-PG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Exemestane  中文名：依西美坦  分子式：C20H24O2  度：98.0%  小鼠白三烯B4(mouse LTB4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Hemapolin  中文名：甲基環(huán)硫雄醇中間體 E  分子式：C20H32OS  度：98.0%  小鼠瘦素(mouse Leptin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝小鼠細胞表面分子CD100   英文名稱：   Mouse cluster of differeiation 100   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CD100  Mannioside A  1038922-95-0  中文名：  分子式：C39H62O13  

小鼠戊糖素elisa試劑盒   小鼠戊糖素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠戊糖素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠戊糖素試劑盒、小鼠戊糖素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     L-Ascorbic acid  50-81-7  中文名：L-抗壞血酸  分子式：C6H8O6 

小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  m-Anisic acid  中文名：間茴香酸  分子式：C8H8O3 

小鼠戊糖素(Peosidine)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Isodiospyrin  20175-84-2  中文名：  分子式：C22H14O6  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  細胞毒活性; 柿屬; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠胃泌酸調(diào)節(jié)素（OXM）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  m-Anisic acid  586-38-9  中文名：間茴香酸  分子式：C8H8O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

饒氏無綠藻探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Humanphospholamban,PLNELISAKit人受0蛋白(PLN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  12-Hydroxyjasmonic acid  140631-27-2  中文名：12-羥基酸  分子式：C12H18O4 

Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-dieno[17,16-d]oxazole-3,20-dione  中文名：  分子式：C23H29NO4 

humanphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISAKit人0酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione  6870-94-6  中文名：  分子式：C22H30O4 

Humanphosphoglyceratemase2,PGAM2ELISAKit人0酸甘油酸變位酶2(PGAM2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  11α-Hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione  中文名：11α-羥基-雄甾-4-烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3 

HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit人0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  11-Hydroxyjasmonic acid  140447-14-9  中文名：  分子式：C12H18O4