參數規(guī)格：

產品名稱：豬鼻支原體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

英文名稱：Mycoplasma hyorhinis

貨號: GOY-M4267

產品規(guī)格：50T

產品運輸：低溫運輸

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

產品及特點:

豬鼻支原體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書是從土壤農桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因，是轉基因植物研究中最為常用的一種篩選標記基因，因此本公司根據探針法 qPCR 原理開發(fā)了專門用于檢測 鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 的試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板。

2. 根據 鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 保守區(qū)域設計引物和探針，能專一性地檢測出樣品中的

鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 成分，但不能檢測其他非 鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 成分。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 一管式閉管操作，降低了交叉污染。

5. 快速，整個檢測過程（按一個樣品計）所需時間僅為 2.0 小時。

6. 本只能用于科研，足夠 50 次 20uL 體系的探針法熒光定量 PCR。

操作步驟：

下列圖示以Venor Gem OneStep 支原體 常規(guī)PCR 檢測試劑盒 (一步法)，具體產品操作以說明書為準。

第1步：樣本處理：

第2步：試劑制備：

第3步：PCR體系建立：

第4步：啟動PCR反應

第5步：電泳結果分析

191bp為內控對照條帶，表明PCR反應正常。

當樣本存在支原體污染時，由于內控對照與支原體DNA存在競爭，內控對照條帶變弱（例如支原體DNA＞103拷貝）。

陽性對照中支原體DNA＞104拷貝，內控對照條帶會完全消失。

可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶，此條帶不影響檢測結果。

如果待測樣本對PCR產生抑制，則內控對照條帶變弱（和陰性對照相比），此時應先進行DNA抽提（推薦使用：Venor Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒），然后再檢測。

實時熒光定量PCR：

實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的：

1）Ct值的重現性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數時，剛剛進入真正的指數擴增期（對數期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現性極好，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增，得到的Ct值是恒定的。

2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。

外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現性最好的定量方法，已得到全世界的公認，廣泛用于基因表達研究、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

使用方法：

一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。

三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）

10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數量相應增加2或3倍。

11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）

f5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde  中文名：  分子式：C26H17ClFN3O3  度：98.0%  線粒體呼吸鏈復合體Ⅱ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣

Pazufloxacin mesilate  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S  度：98.0%  線粒體呼吸鏈復合體Ⅲ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣

Strontium ranelate  中文名：雷尼酸鍶  分子式：C12H10N2O8S  度：98.0%  線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣

N1-Methyl-4-nitrobenzene-1,2-diamine  中文名：  分子式：C7H9N3O2  度：98.0%  α戊二酸脫氫酶（α-KGDH）試劑盒   紫外分光光度法   50管/48樣           

Lapatinib  中文名：拉帕替尼  分子式：C29H26ClFN4O4S  度：98.0%  線粒體促凋亡蛋白 (SMAC)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Benzyl-1H-indazol-3-ol  2215-63-6  中文名：1-芐基-1H-吲唑-3-醇  分子式：C14H12N2O  度：98.0%   

兔子細胞間粘附分子1elisa試劑盒   兔子細胞間粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子細胞間粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子細胞間粘附分子1試劑盒、兔子細胞間粘附分子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Abscisic acid  14375-45-2  中文名：脫落酸  分子式：C15H20O4 

兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Abscisic acid  中文名：脫落酸  分子式：C15H20O4 

兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene  中文名：9,9-雙(4-羥苯基)芴  分子式：C25H18O2  度：98.0%

兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Benzyl D-aspartate  中文名：D-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4  度：98.0%小鼠血清總補體(CH50)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Methyltestosterone  中文名：甲基睪酮  分子式：C20H30O2  度：98.0%

小鼠血清淀粉樣蛋白elisa試劑盒   小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒、小鼠血清淀粉樣蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     Metronidazole  443-48-1  中文名：甲硝唑  分子式：C6H9N3O3 

小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Minisecolide C  1967030-77-8  中文名：  分子式：C28H34O7 

小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     Gliquidone  33342-05-1  中文名：格列喹酮  分子式：C27H33N3O6S 

小鼠血清(NO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Minisecolide C  1967030-77-8  中文名：  分子式：C28H34O7  度：%  關鍵詞：

豬鼻支原體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書L-(+)-Arginine  中文名：L-(+)-精氨酸  分子式：C6H14N4O2  度：98.0%  小鼠白介素-17   英文名稱：    ierleukin-17   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-17

D-Aspartic acid  中文名：D-天冬氨酸  分子式：C4H7NO4  度：98.0%  小鼠白介素-18   英文名稱：    ierleukin-18   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-18

L-Ascorbic acid  中文名：L-抗壞血酸  分子式：C6H8O6  度：98.0%  小鼠白介素-23   英文名稱：    ierleukin-23   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-23

Anthraquinone  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2  度：98.0%  小鼠白介素-27   英文名稱：   ierleukin-27   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-27

p-Anisil  中文名：茴香偶酰  分子式：C16H14O4  度：98.0%  小鼠白介素16(IL-16)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

服務流程：

1、根據客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針（染料法只需設計引物）

2、抽提DNA、RNA，并對RNA進行逆轉錄

3、實時熒光定量PCR

4、提供完整的實驗結果報告(檢測數據、溶解曲線、擴增曲線)

5、返還樣品（引物、RNA和cDNA）