線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶檢測(cè)試劑盒_25管/12樣(之禮生物提供)
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線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ-ATP合酶-三磷酸腺苷合酶檢測(cè)試劑盒-25管-12樣(之禮生物提供)

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品牌 之禮生物
規(guī)格 25管/12樣
測(cè)定方法 分光光度法
用途 僅供科研使用
產(chǎn)品包裝 液體盒裝
最小起訂 1盒起訂
供應(yīng)商 上海之禮生物科技有限公司
保持期 6個(gè)月
保存條件 低溫、避光保存
供貨數(shù)量 706
商品介紹
?科研提供 線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶檢測(cè)試劑盒_25管/12樣

測(cè)定意義:
線粒體復(fù)合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶,廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,由F1和F0兩個(gè)亞單位組成。該酶利用呼吸鏈產(chǎn)生的質(zhì)子電化學(xué)梯度催化ATP合成,也可逆過(guò)程水解ATP。此外,復(fù)合體Ⅴ還存在于葉綠體、異養(yǎng)菌和光合細(xì)菌中。復(fù)合體Ⅴ是線粒體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關(guān)鍵酶。

測(cè)定原理:
復(fù)合體Ⅴ水解ATP產(chǎn)生ADP和Pi,通過(guò)測(cè)定Pi增加速率來(lái)測(cè)定復(fù)合體Ⅴ活性。

需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前處理:
組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
①準(zhǔn)確稱取0.1g組織或收集500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞,加入1mL試劑一和10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
②將勻漿600g,4℃離心5min。
③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
④上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測(cè)定從線粒體泄漏的復(fù)合體Ⅴ(此步可選做)。
⑤步驟④中的沉淀即為線粒體,加入800uL試劑二和8uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10秒,重復(fù)30次),用于復(fù)合體Ⅴ酶活性測(cè)定。
注    意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。


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公司名稱 上海之禮生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 夏力 (QQ:2881498548)
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地址 上海市閔行區(qū)
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