APPLYGEN 預(yù)制膠 Tris-Glycine  6%, 10孔, 1.5mm

規(guī)格：10片/盒

品牌：子科生物ZIKER

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

APPLYGEN 預(yù)制膠 Tris-Glycine是一款安全、快捷、高性能的預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠，常用于PAGE和Western blot檢測(cè)。特點(diǎn)如下：

? 采用自動(dòng)化的灌膠生產(chǎn)技術(shù)，產(chǎn)品質(zhì)量好、穩(wěn)定性高、重復(fù)性佳。

? 采用玻璃膠板，有效減少蛋白非特異性吸附，使蛋白條帶更為敏銳，清晰。

? 膠夾打開極為輕松，只需用刀片在膠夾一側(cè)輕輕劃一下即可打開。

? 兼容市場(chǎng)上主流的mini電泳槽，如Bio-Rad, Invitrogen, 天能和君意東方等

基本信息：

使用說(shuō)明：

1. 將GLASS Gel Tris-Gly gel預(yù)制膠從包裝袋中取出。

2. 將預(yù)制膠固定在電泳槽中。

3. 準(zhǔn)備電泳緩沖液：推薦使用普利萊B1005 10X電泳緩沖液，取50ml母液，加450mL ddH2O，得到500mL 1X 電泳緩沖液。

4. 內(nèi)槽加滿電泳液，外槽的電泳液最低須加到1/3液面處，最高不可漫過(guò)膠板，再緩慢地將梳子拔出。

5. 上樣前請(qǐng)使用移液器吸取電泳緩沖液輕輕吹打加樣孔，去除加樣孔內(nèi)殘余的膠液。

6. 上樣：將蛋白樣品與5X 變性loading buffer（B1012）進(jìn)行4：1混合均勻，加熱處理。注意槍頭不要戳破凝膠，不要過(guò)度插入梳孔使膠板變形造成漏液。

7. 電泳條件：180V, 60 min，當(dāng)溴酚藍(lán)指示帶電泳至膠板底部，或?qū)嶒?yàn)預(yù)定位置時(shí)，即可結(jié)束電泳。

8. 電泳結(jié)束，取出凝膠。用刀在側(cè)邊膠處，沿著兩片玻璃的縫隙切開封膠材料，即可打開玻璃板，取膠時(shí)，需在凝膠和玻璃條之間，沿著玻璃條劃一刀，防止取膠時(shí)，發(fā)生粘連使膠破

碎。（使用美工刀時(shí)請(qǐng)注意安全）

拆膠：

1.先沿側(cè)邊膠處簡(jiǎn)單劃一刀（或先將玻璃板側(cè)邊多余封膠材料去除）；

2.用刀在側(cè)邊膠處，沿著玻璃板和玻璃條的縫隙切開封膠材料（箭頭處），輕輕打開玻璃板；

3.取膠時(shí)，需在凝膠和兩側(cè)玻璃條之間沿著玻璃條劃一刀，防止取膠時(shí)發(fā)生粘連使凝膠破碎。

產(chǎn)品運(yùn)輸和保存：

1.常溫運(yùn)輸，常溫保存時(shí)應(yīng)放置于陰涼處，避免溫度劇烈變化和陽(yáng)光直射。

2.4-8℃保存，可以存放12個(gè)月。

3.請(qǐng)勿置于0℃以下，凝膠在0℃以下會(huì)凍凝，產(chǎn)生氣泡和裂紋，凝膠報(bào)廢。

APPLYGEN 預(yù)制膠 Tris-Glycine兼容的電泳槽:

a.Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System)

b.Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)

c.Life Technology Novex Mini-Cell (需與特制擋板配合使用，免費(fèi)提供)

d.北京六一  DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF

e.君意東方 JY-SCZ2+

f.天能 VE180

g.或其它膠板寬度在10厘米的電泳槽

在Life Technology Novex電泳槽中的應(yīng)用：

在Bio-Rad電泳槽中的應(yīng)用：

Bio-Rad Mini-PROTEAN系列電泳槽的U型密封條頂部有突起結(jié)構(gòu)，而APPLYGEN 預(yù)制膠 Tris-Glycine系列預(yù)制膠的短玻板是凹形結(jié)構(gòu)，因此該部位是平的，電泳前需將具有突起結(jié)構(gòu)的密封條取出后反過(guò)來(lái)安裝，是平滑面朝外，從而防止漏液（如下圖所示）。另有厚度約為0.5mm的塑料墊片，請(qǐng)根據(jù)您電泳槽的實(shí)際寬度進(jìn)行相應(yīng)的增加。

a.將Bio-Rad電泳槽中的U型密封條（如圖綠色部分） 拉出，注意這時(shí)的密封條兩端是有突起的，突起的這面為正面，無(wú)突起的為反面。

b.將密封條旋轉(zhuǎn)180度(正面朝里，反面朝外)，重新裝回電泳槽中，注意把密封圈周邊壓實(shí)，防止發(fā)生漏液。

c.放置好預(yù)制膠進(jìn)行正常的電泳操作即可。

注意事項(xiàng)：

1. 電壓為180V電泳時(shí)，1塊膠的電流在75mA左右，2塊膠的電流在150mA左右，隨時(shí)間增加電流逐步降低。濕轉(zhuǎn)時(shí)120V恒壓轉(zhuǎn)膜60-90min。

2. 為達(dá)到更好的轉(zhuǎn)膜效果，可以根據(jù)預(yù)制膠上殘留的預(yù)染marker及膜上的預(yù)染marker確定轉(zhuǎn)膜效率，并對(duì)轉(zhuǎn)膜條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。目的蛋白的分子量，凝膠濃度及轉(zhuǎn)膜液中的甲醇濃度都會(huì)影響轉(zhuǎn)膜效率。 大蛋白盡量選擇低濃度的膠。

3. 電泳結(jié)束后可以使用Tris-Gly轉(zhuǎn)膜液進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。將凝膠浸泡在轉(zhuǎn)膜液中10-15min, 使凝膠中的緩沖液得到充分平衡，再進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。

4. 上樣時(shí)槍頭不要過(guò)度插入梳孔，以免戳破凝膠造成漏液。

5. 僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。