武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營：動(dòng)植物,細(xì)菌,細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營：動(dòng)植物,細(xì)菌,細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)

原位雜交過程

雜交前可進(jìn)行預(yù)雜交，以防止較高的背景染色。預(yù)雜交條件與雜交條件相同，只是預(yù)雜交液中不含探針和硫酸葡聚糖。

靶DNA的變性（對(duì)mRNA的原位雜交無需此步）

樣品DNA的變性在DNA-DNA雜交檢測(cè)中是必須的步驟，但同時(shí)可能會(huì)造成樣品形態(tài)學(xué)的部分破壞，此步是實(shí)驗(yàn)中需要優(yōu)化的一個(gè)步驟。常用的變性方法為堿變性和熱變性，實(shí)驗(yàn)時(shí)可以摸索變性時(shí)間、變性溫度等參數(shù)以獲得佳條件。

如使用熱變性方法，可在雜交時(shí)將探針的變性和樣品DNA變性同步進(jìn)行：將樣品和探針溶液加蓋蓋玻片，置于烘箱80℃變性，染色體DNA樣品處理2min，后冷卻至37℃進(jìn)行雜交。組織樣品DNA的變性時(shí)間可增加至80℃10min。

肝纖維化動(dòng)物模型化學(xué)性損傷法：

雄性Wistar大鼠，體重130g左右，用腹腔內(nèi)注射，次20mg/100g體重，從第二次起12mg/100g體重，每周注射2次，共8周。

評(píng)價(jià):第3周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞變性壞死和炎細(xì)胞浸潤，炎細(xì)胞浸潤、壞死細(xì)胞數(shù)和程度超過豬模型。6周后出現(xiàn)纖維束，纖維晚于和少于豬模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。

1、致模因素對(duì)動(dòng)物模型的影響

應(yīng)明確研究目的，清楚相應(yīng)人類疾病的發(fā)生、臨床癥狀和發(fā)病機(jī)制，熟悉致病因素對(duì)動(dòng)物所產(chǎn)生的臨床癥狀和發(fā)病情況，致病因素的劑量。

2、動(dòng)物因素對(duì)動(dòng)物模型的影響  

品種、品系、年齡體重、性別、生理狀態(tài)等

3、實(shí)驗(yàn)技術(shù)因素對(duì)動(dòng)物模型的影響

實(shí)驗(yàn)季節(jié)、晝夜過程、深度、手術(shù)技巧、實(shí)驗(yàn)給藥、對(duì)照組的影響等。

4、環(huán)境因素和營養(yǎng)因素對(duì)動(dòng)物模型的影響

模型的成敗往往與環(huán)境的改變有密切關(guān)系。擁擠、飲食改變、過度光照、噪音、屏障系統(tǒng)的破壞等，任何一項(xiàng)被忽視都可能給模型動(dòng)物帶來嚴(yán)重影響。