大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒的原理：

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。ELISA試劑盒在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體。

ELISA試劑盒樣本收集以及處理方法：

液體類標(biāo)本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1）血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
A、檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）。仔細(xì)收集上清。
B、檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5）組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒標(biāo)本的稀釋原則：
首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。*計(jì)算濃度時(shí)，稀釋了“N”倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

【生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則】
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

【試劑盒特點(diǎn)】

A. 分子量大。合成肽采用化學(xué)方法制備，由于工藝的局限，合成數(shù)量有限，只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸;而利用基因工程制備的抗原，分子量更大。
B. 穩(wěn)定性好。人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒包被的抗原的穩(wěn)定性可使試劑盒的效期得到保證，早期以合成肽為包被抗原的試劑盒效期只3-4個(gè)月，采用基因工程抗原后效期大大延長(zhǎng)了。
C. 基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇，可提高試劑盒的靈敏度，提高檢出率。
D. 純化難度大?；蚬こ炭乖募兓夹g(shù)難度較大。
合成多肽抗原是根據(jù)蛋白質(zhì)抗原分子的某一抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。合成肽抗原有以下特點(diǎn)： a.分子量太小;b.一般只含有一個(gè)抗原決定簇;c.純度高;d.穩(wěn)定性差。

【實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)】

一、標(biāo)本收集體積 100μl 。當(dāng)天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)標(biāo)本儲(chǔ)存在4℃備用。標(biāo)本2-8℃可以保存48小時(shí)；-20℃可以保存1個(gè)月，-70℃可以保存309個(gè)月。標(biāo)本避免反復(fù)凍融。
二、血清標(biāo)本采集避免溶血。紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放具有過(guò)氧化物酶活性物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
三、標(biāo)本宜在新鮮時(shí)代測(cè)。保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的樣本可能發(fā)生聚合，ELISA實(shí)驗(yàn)中會(huì)使本底加深。
四、反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低，樣本可以少量分裝保存或者適當(dāng)加入防腐劑。
五、如果您在購(gòu)買我們公司試劑盒后操作中遇到任何特殊問(wèn)題，敬請(qǐng)咨詢我司。
ELISA檢測(cè)范圍準(zhǔn)確，質(zhì)量可靠，靈敏度高，產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)操作簡(jiǎn).穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,*限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi).

購(gòu)買大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題：
1、產(chǎn)品價(jià)格有*優(yōu)惠？
Xuanya烜雅有明確的價(jià)格體系，具體的價(jià)格可咨詢我們的工作人員。
2、提供*的付款方式？
Xuanya烜雅為廣大科研工作者提供*服務(wù)。
3、提供代測(cè)服務(wù)嗎？提供免費(fèi)的代測(cè)服務(wù)嗎？
我司為廣大科研工作者提供代測(cè)服務(wù)，我們的代測(cè)是免費(fèi)的，具體請(qǐng)聯(lián)系我們工作人員。
4、Xuanya烜雅售后服務(wù)？
（1）如是產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題，我們將免費(fèi)為您替換試劑盒。
（2）如實(shí)驗(yàn)者未按照說(shuō)明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)導(dǎo)致的問(wèn)題，我司將不負(fù)有責(zé)任。
5、發(fā)貨周期是*樣的？
（1）常用指標(biāo)在客戶下單后即可發(fā)貨。
（2）不常見(jiàn)指標(biāo)，我公司為您篩選定制抗體對(duì)，生產(chǎn)完成后即可發(fā)貨，供貨周期根據(jù)不同指標(biāo)時(shí)間不一樣，具體請(qǐng)聯(lián)系我們的工作人員。

大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒新產(chǎn)品：

人胸苷酸合成酶(TS)ELISA試劑盒    Human   thymidylate synthetase,TS ELISA試劑盒    

人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒    Human   thymidinephosphorylase,TP ELISA試劑盒    

人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒    Human   Poly ADP ribose polymerase,PARP ELISA試劑盒     

人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒    Human   glucokinase,GCK ELISA試劑盒    

人單胺氧化酶(M