武漢尚恩生物技術有限公司
主營產(chǎn)品: 細胞系, 原代細胞, 培養(yǎng)基, 血清, 試劑
bEnd.3細胞小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞尚恩專業(yè)細胞廠家小鼠細胞系
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經(jīng)營模式
生產(chǎn)廠家
所在地區(qū)
湖北省武漢市
主營產(chǎn)品
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞 |
細胞別稱 | bEnd.3; bEND.3; b.End3; Bend.3; bEnd3; brain-derived Endothelial cells.3 |
細胞貨號 | SNL-158 |
細胞種屬 | 小鼠 |
生長情況 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | H-DMEM+10%FBS+1%雙抗 |
培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
二、細胞培養(yǎng)操作 | |
換液周期 | 2-3天 |
培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
傳代比例 | 1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定) |
傳代方法 | 1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基; 2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS; 3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層; 4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化; 5.消化到細胞間隙變大,但未完全脫落時加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化; 6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清; 7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里; 8.補足完全培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng); |
注意事項 | 不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間 消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。 |
三、細胞凍存操作 | |
凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml,1ml每管 |
凍存方法 | 1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞; 2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管; 3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
注意事項 | 凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案 |
Tips:
1.細胞培養(yǎng)時黑點可能會比較多,具體原因參見培養(yǎng)操作說明2、3條;
我們推薦使用尚恩生物bEnd.3 (小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞)專用完全培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNLM-158)作為體外培養(yǎng)bEnd.3 (小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞)的培養(yǎng)基。
············ 武漢尚恩(Sunncell)18507182912 ············
1、產(chǎn)品優(yōu)勢:500多株細胞,STR鑒定,發(fā)貨代數(shù)低,活性好,無支原體、細菌、霉菌等污染;
2、質(zhì)量保證:產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,10年以上細胞研發(fā)經(jīng)驗 通過ISO認證和CE認證;
3、團隊優(yōu)勢:海內(nèi)外博士、教授組成的研發(fā)和管理團隊,具有十年的技術經(jīng)驗,擁有成熟的分子生物學技術、免疫學技術、蛋白表達純化技術、抗體篩選及制備等多個生物學平臺;
4、技術支持:24小時技術在線答疑;
5、服務周到:廠家現(xiàn)貨直發(fā),3個工作日順豐快遞,售后無憂,24小時快速響應。