PCR DNA聚合酶類
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PCR-DNA聚合酶類

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上海博爾森生物科技有限公司

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主要組成成分 2×mTTx MasterMix ；上游引物（10 μM） ；下游引物（10 μM）；熒光探針（10 μM）；RNA；ddH2O ;
貨號 BES2206A
性狀 水劑
適應(yīng)癥 科研使用
規(guī)格 250U
貯藏 -20℃可保存3年，避免反復(fù)凍融
有效期 3年
生產(chǎn)企業(yè) 上海博爾森生物科技有限公司
運(yùn)輸方式 快遞
單位定義 一個活力單位即在在68°C條件下，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量
商品介紹

               熱啟動mTTx DNA/RNA 聚合酶

熱啟動mTTx DNA/RNA 聚合酶（HaiGene創(chuàng)新性工具酶）

產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱規(guī)格價格(元)說明書
BES2206A熱啟動mTTx DNA/RNA 聚合酶 (5U/ul)250U1,750咨詢
BES2261AmTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix1 ml750咨詢
BES2261B25 ml10,000
TTx DNA聚合酶源于Tth DNA聚合酶，而逆轉(zhuǎn)錄活性較Tth DNA聚合酶大幅提高，在優(yōu)化的反應(yīng)Buffer中，TTx表現(xiàn)出卓越的RT-PCR特性，但TTx DNA Polymerase的活性仍然依賴于對PCR有抑制活性的Mn2+，這種專用的反應(yīng)Buffer系統(tǒng)限制了TTx應(yīng)用的拓展性。mTTx DNA/RNA聚合酶經(jīng)電子重構(gòu)架技術(shù)，改變了TTx的活性配體中心，使其在Mg2+條件下仍然具有極強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)錄活性。mTTx DNA/RNA Polymerase在Mg2+條件下對于DNA模板和RNA模板擴(kuò)增能力幾乎無偏差，這種獨(dú)有的特性使得mTTx不再受限于反應(yīng)Buffer系統(tǒng)，增加了其應(yīng)用的拓展性，使得多種類型的實(shí)驗(yàn)得以實(shí)現(xiàn)，包括：采用單酶進(jìn)行TaqMan RT-PCR、在單管相同的Buffer系統(tǒng)中對RNA和DNA進(jìn)行多重檢測、超多重的RNA模板擴(kuò)增、RNA的NGS建庫、高保真RT-PCR擴(kuò)增等。

主要特征

  • 依賴于DNA模板的聚合酶活性；
  • 5'-3'外切酶活性，用于TaqMan探針切割；
  • 金屬配體離子為Mg2+，通常使用濃度2-3.5mM；
  • 可以有效的使用dUTP，建立防污染體系；
  • 相比于TTx DNA聚合酶，mTTx的耐熱性能有所下降，92℃條件下的半衰期為30min；
  • 熱啟動版本的mTTx在50℃條件下100%無活性，92℃加熱5min后恢復(fù)活性。

單位定義

一個活力單位即在在68°C條件下，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。

儲存

-20℃可保存3年，避免反復(fù)凍融。

使用方法（以mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix為例）

1. 按以下組分配制RT-qPCR反應(yīng)液
2×mTTx MasterMix                                             10 μl
上游引物（10 μM）                                             0.4 μl
下游引物（10 μM）                                             0.4 μl
熒光探針（10 μM）                                             0.2 μl
RNA                                                                        X μl
ddH2O                                                        Up to 20 μl
注意：引物和探針的使用濃度可在0.1-0.8ul直接調(diào)整。
2. Direct One-Step RT-PCR程序
92℃      5 min (熱啟動)
60℃      5 min (逆轉(zhuǎn)錄)
92℃     10 s 
60℃      30 s（收集信號）  循環(huán)35-45次
注意：mTTx的最佳變性溫度為92℃，其它溫度條件都會導(dǎo)致試劑性能下降。逆轉(zhuǎn)錄步驟的溫度可根據(jù)實(shí)際情況在58-70℃調(diào)整。

實(shí)例展示

1. 以病毒N基因體外轉(zhuǎn)錄RNA直接作為模板，應(yīng)用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix對不同拷貝的目標(biāo)RNA進(jìn)行TaqMan qPCR擴(kuò)增，結(jié)果表明不同拷貝數(shù)的RNA，擴(kuò)增性能良好。
直接一步法RT-qPCR
2. 應(yīng)用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix對不同拷貝的目標(biāo)DNA和RNA進(jìn)行TaqMan qPCR擴(kuò)增，結(jié)果表明該產(chǎn)品對DNA模板和RNA模板擴(kuò)增幾乎無偏差，RNA模板比DNA模板更容易檢出。
直接一步法RT-qPCR
3.將不同數(shù)量的Jurkat細(xì)胞直接加入到TaqMan PCR反應(yīng)體系中，應(yīng)用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix進(jìn)行內(nèi)參基因GAPDH的TaqMan qPCR擴(kuò)增。
直接一步法RT-qPCR


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公司名稱 上海博爾森生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 楊柳 （QQ：3597200582）
電話 쑡쑤쑥-쑦쑣쑦쑢쑥쑢쑢쑣
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網(wǎng)址 https://www.bioesn.net/
地址 上海市松江區(qū)
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