需自備試劑和器材：

1． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2． 自動(dòng)洗板機(jī)。

3.  37℃恒溫箱。

4． 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)用多通道移液器。

5． 干凈的試管和 Eppendof 管。

6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。

9.  蒸餾水

10. 吸水紙 

產(chǎn)品名稱：小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA檢測試劑盒

英文名稱：ColⅢ

規(guī)格：96T/48T

特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好

用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷

運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)

試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

實(shí)驗(yàn)步驟:

石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次

10 min； 

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%

乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 

4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫

度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×

2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，

直接進(jìn)入第 5 步封閉。 

5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 

6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育

30 min； 

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 

12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37

℃濕盒中孵育 30 min； 

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 

14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 

15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 

16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體AKT1(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase) ELISA KitAlias: PKB|AKT1|PKBalpha|PRKBA|RAC-alpha|AKT|PKBMGC99656|ProteinkinaseB|Proto-oncogenec-Akt|racproteinkinasealpha|RAC-ALPHA|RAC-alphaserine|threonine-proteinkinase|RAC-PK-alpha|RACPKB-ALPHA|v-aktmurinethymomaviraloncogenehomolog1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

受體激活蛋白激酶C1抗體COL15A1(Collagen alpha-1 XV) ELISA KitAlias: COL15A1(Collagenalpha-1XV)ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

孤兒核受體抗體SERPINE1(Plasminogen activator inhibitor 1) ELISA KitAlias: PAI-1|PAI1|SERPINE1|Nexin|PLANH1|Endothelialplasminogenactivatorinhibitor|PAISerpinE1|PLANH1|plasminogenactivatorinhibitor1|serine(orcysteine)proteinaseinhibitor|cladeE(nexin|plasminogenactivatorinhibitortype1)|member1|serpinpeptidaseinhibitor|cladeE(nexin|plasminogenactivatorinhibitortype1)|member1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.391-25ng/mlSensitivity: 0.234ng/ml

Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1PDGFC(Platelet-derived growth factor C) ELISA KitAlias: PDGFC|FALLOTEIN|Fallotein|fallotein|PDGF-C|plateletderivedgrowthfactorC|platelet-derivedgrowthfactorC|SCDGF|Spinalcord-derivedgrowthfactor|secretorygrowthfactor-likeprotein|VEGF-EELISAKitReactivity: HumanRange: 62.5-4000pg/mlSensitivity: 37.5pg/ml

核糖體S6激酶RSK2抗體INHA(Inhibin alpha chain) ELISA KitAlias: INHA|InhibinA|A-inhibinsubunit|inhibinalphachain|inhibin|alphaELISAKitReactivity: HumanRange: 15.625-1000pg/mlSensitivity: 9.375pg/ml

磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體FGF2(Heparin-binding growth factor 2) ELISA KitAlias: FGF2|bFGF|FGF-2|FGF2AS|GFG1|HBGH-2|NUDT6|Prostatropin|Basicfibroblastgrowthfactor|BFGF|FGFBprostatropin|fibroblastgrowthfactor2(basic)|HBGF-2|heparin-bindinggrowthfactor2|FibroblastGrowthFactorbasic|FGFbasic|B-FGF|FGFB|HBGF-2|prostatropinELISAKitReactivity: HumanRange: 12.5-800pg/mlSensitivity: 7.5pg/ml

細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體（復(fù)制因子C）KitLG(Kit ligand) ELISA KitAlias: SCF(StemCellFactor)|KITLG|Kitligand|c-Kitligand|MGF|MastcellgrowthfactorELISAKitReactivity: HumanRange: 31.25-2000pg/mlSensitivity: 18.75pg/ml

磷酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體TIE1(Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1) ELISA KitAlias: TIE1(Tyrosine-proteinkinasereceptorTie-1)|receptortyrosinekinase|solubleTIE1variant1|solubleTIE1variant2|solubleTIE1variant5|TIEsolubleTIE1variant4|tyrosinekinasewithimmunoglobulinandepidermalgrowthfactorhomologydomains1|tyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA KitAlias: TRAIL|TNFSF10|CD253|Apo-2ligand|APO2L|Apo-2Ltumornecrosisfactor(ligand)family|member10ELISAKitReactivity: HumanRange: 15.625-1000pg/mlSensitivity: 9.375pg/ml

磷酸化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體CGA(Chromogranin A) ELISA KitAlias: CGA(ChromograninA)ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.781-50ng/mlSensitivity: 0.469ng/ml

雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體FTH1(Ferritin heavy chain) ELISA KitAlias: FTH1|FHC|FTH|PLIF|FTHL6|PIG15|CellprolifeRation-inducinggene15protein|FerritinHsubunit|Ferritin|HeavyPolypeptideELISAKitReactivity: HumanRange: 78.125-5000pg/mlSensitivity: 46.875pg/ml

核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體FTL(Ferritin light chain) ELISA KitAlias: FTL(Ferritinlightchain)|FerritinLsubunitELISAKitReactivity: HumanRange: 62.5-4000pg/mlSensitivity: 37.5pg/ml

S6核糖體蛋白抗體AMH(Muellerian-inhibiting factor) ELISA KitAlias: AMH|MIS|muellerian-inhibitingfactor|Mullerianinhibitingfactor|Anti-Muellerianhormone(AMH)|Muellerian-inhibitingsubstance(MIS)ELISAKitReactivity: HumanRange: 46.875-3000pg/mlSensitivity: 28.125pg/ml

細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體RORC(Nuclear receptor ROR-gamma) ELISA KitAlias: RORC|RORgamma|NR1F3|RZRG|MGC129539|nuclearreceptorROR-gamma|NuclearreceptorRZR-gamma|Nuclearreceptorsubfamily1groupFmember3|RAR-relatedorphanreceptorC|RAR-relatedorphanreceptorgamma|retinoicacid-bindingreceptorgamma|retinoid-relatedorphanreceptorgamma|Retinoid-relatedorphanreceptor-gamma|RORGMGC129539|RZRGRZR-GAMMA|TORELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

呼吸道合胞抗體CNTF(Ciliary neurotrophic factor) ELISA KitAlias: CNTF|HCNTFELISAKitReactivity: HumanRange: 31.25-2000pg/mlSensitivity: 18.75pg/ml
小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA檢測試劑盒氯化芍藥素-3-O-阿拉伯糖苷Peonidin-3-O-arabinoside chloride化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 524943-91-7 分 子 式:  分 子 量: 儲(chǔ)存條件:  2-8℃外觀:  Powder

青蒿素artemisinin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 63968-64-9 分 子 式: C15H22O5 分 子 量: 282.33熔點(diǎn):  156-157比重:  1.24比旋光度:  (C=0.5, MeOH)+75儲(chǔ)存條件:  2-8℃

SDS溶液(10%,pH7.2)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

堿性凝膠加樣緩沖液(6×)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

異紫花前胡內(nèi)酯Marmesin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 13849-08-6 分 子 式: C14H14O4 分 子 量: 246.25856熔點(diǎn):  189.5比旋光度:  +26.8 (CHCl3)儲(chǔ)存條件:  2-8℃檢測方法:  HPLC≥98%

牛磺鵝脫氧膽酸鈉鹽Sodium taurochenodeoxycholate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 6009-98-9 分 子 式: C26H44NNaO6S 分 子 量: 521.68

甲基小檗堿中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量: 儲(chǔ)存條件:  2-8℃檢測方法:  HPLC≥98%來源:  黃連

風(fēng)信子素(2-(1-Ethoxyethoxy)ethyl)benzene中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 2556-10-7 分 子 式: C12H18O2 分 子 量: 194.27012儲(chǔ)存條件:  2-8℃檢測方法:  HPLC≥98%來源:  風(fēng)信子
樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。

仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。