使用方法:

一、牛莫拉氏菌LAMP試劑盒50次稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

產(chǎn)品名稱：牛莫拉氏菌LAMP試劑盒50次

英文名稱：Lamp kit for Moraxella bovis

產(chǎn)品貨號(hào)：GOY7232

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。

設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 

下列是牛莫拉氏菌LAMP試劑盒50次的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
阿拉中文綜合目錄 中文兔腎素(Renin)ELISA試盒

阿拉中文綜合目錄 英文兔腎素(Renin)ELISA試盒

化銨溶液 ACS,22.0-24.0%兔子樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試盒

高氯鎂，無(wú)水 AR兔子樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試盒

無(wú)水鈣 AR,97.0%兔子樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試盒

鋁 CP兔子樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試盒

銨 CP,95.0%兔子(INS)ELISA試盒

銨 AR,98.0%兔子(INS)ELISA試盒

高氯銨 AR兔子(OxLDL)ELISA試盒

偶氮胭脂紅B Biological stain兔子(OxLDL)ELISA試盒

氯化鉍 AR兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試盒

氯化鉍 CP兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試盒

氯化鉍 99.99% metals basis，無(wú)水級(jí)兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試盒

氯化鉍 99.999% metals basis，無(wú)水級(jí)兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試盒

二苯胺磺鋇 CP兔過(guò)物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試盒
牛莫拉氏菌LAMP試劑盒50次 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子CALL抗體 PFN1 ELISA Kit 抑絲蛋白1(PFN1)ELISA試盒

維生素D3 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 100mg

 中性粒細(xì)胞殺菌蛋白BP30抗體 OSMR ELISA Kit 抑瘤素M受體(OSMR)ELISA試盒

氨砜 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 50mg

 T淋巴細(xì)胞CD1抗體 PCYOX1 ELISA Kit 異半胱氨化酶1(PCYOX1)ELISA試盒

頭孢羥氨芐 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 100mg

 21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框56抗體 MTDH ELISA Kit 異粘蛋白(MTDH)ELISA試盒

托芬那 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 100mg

 細(xì)胞角蛋白5抗體 HP1 ELISA Kit 異染色質(zhì)蛋白1(HP1)ELISA試盒

拉莫三嗪 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 100mg

 補(bǔ)體C9a抗體 IDH2 ELISA Kit 異檸檬脫酶2(IDH2)ELISA試盒

門冬氨鎂 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 25mg

 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框141抗體 IDH1 ELISA Kit 異檸檬脫酶1(IDH1)ELISA試盒

漆姑草 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 1g

 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框160抗體 DTNβ ELISA Kit 異連蛋白β(DTNβ)ELISA試盒

籬欄網(wǎng) 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 2.5g 
技術(shù)保護(hù)點(diǎn):

一種用于檢測(cè)螺旋體的LAMP引物組，其特征在于，包括一對(duì)外引物和一對(duì)內(nèi)引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述內(nèi)引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內(nèi)引物和反向內(nèi)引物。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！