豬偽狂犬病PCR診斷試劑盒
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用途范圍 科研
純度 詳詢客服
產(chǎn)地 國產(chǎn)
品牌 上海滬崢
規(guī)格 20T/50T
貨號 HZ-75233
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基本信息
用途范圍:科研
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產(chǎn)地:國產(chǎn)
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上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售豬偽狂犬病PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨,我公司供應的分子生物學試劑品類齊全,且具有優(yōu)勢價格,歡迎新老客戶咨詢認購。

產(chǎn)品詳細信息

【用途】  用于豬偽狂犬病的檢測、診斷和流行病學調(diào)查。

【操作步驟】

1. 病料處理

   取適量病料大腦、扁桃體、肺臟等組織,于滅菌研缽充分研磨,用PBS液按照1:3稀釋成均勻乳劑,-20℃反復凍融3次以上。

2 . DNA的抽提

(1) 取已凍融好的病料,8000r/min離心5min,取上清500μl(或質(zhì)控樣品T,500μl),加50μl SR-I和6μl SR-II,50℃水浴1~2h,并不時顛倒混勻一下;

(2) 加入等量酚:氯仿(1:1),漩渦振蕩20秒,4℃,12000r/min,離心5min;

(3) 取上清,加入等量氯仿,振蕩混勻,4℃,12000r/min,離心5min;

(4) 取400μl上清,加入800μl無水乙醇,再加40μl SR-III,混勻。-20℃放置30~60min,4℃、12000r/min,離心10min,小心棄上清,沉淀即為DNA。用75%乙醇(滅菌雙蒸水配,每次加入500μl)洗滌2次,小心吸去75%乙醇,勿使DNA丟失,室溫晾干或超凈工作臺風干15-25min,加入20μlTU-5溶解即為模板,即用或-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

3.PCR操作

 3.PCR操作

 4.電泳

 4.電泳:

   稱量0.25g瓊脂糖,放入錐形瓶,加入25mL 1×TAE液(可配置50×濃縮液,儲存?zhèn)溆茫?,于微波爐中熔解,加入1.5μl的TU-9混勻。封閉好電泳槽,加入梳子,倒入瓊脂凝膠,待凝固后,將PCR產(chǎn)物6μl混合1.5μl TU-7,加樣于凝膠孔中,同時在相鄰孔加入3μlTU-8,在100v 電壓下,1×TAE液中電泳30分鐘,在紫外成像儀下觀察結(jié)果。

 

【結(jié)果判定】

    在220bp位置出現(xiàn)擴增帶,實驗結(jié)果為陽性

豬偽狂犬病PCR診斷試劑盒

【注意事項】

1. 每次使用,開蓋之前請先瞬時離心,使試劑沉于管底。

2. 所有試劑在要求溫度下保存,-20℃保存試劑盡量減少反復凍融,使用后的試劑立即放回,避免在室溫擱置太久。

3. 盡量建立PCR試驗操作區(qū),避免交叉污染。

4. 加樣和反應程序嚴格按照說明書進行,由于操作失誤、移液器不精確、定時不準確造成無結(jié)果情況,不予負責。

5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前,要高壓滅菌,操作過程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁,可用鑷子夾取。

6. 注意防止試劑污染,在有效期限前用完。



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